解放軍文職招聘考試原位PCR技術的基本原理-解放軍文職人員招聘-軍隊文職考試-紅師教育
發(fā)布時間：2017-10-06 21:59:53原位PCR技術的基本原理，就是將PCR技術的高效擴增與原位雜交的細胞定位結合起來，從而在組織細胞原位檢測單拷貝或低拷貝的特定的DNA或RNA序列。PCR技術是在DNA聚合酶的作用下，經(jīng)過模板的變性、退火和引物延伸三種循環(huán)，將引物引導下的特異性靶序列迅速地進行擴增，經(jīng)過擴增的靶序列（一般能擴增106倍），很容易在凝膠電泳或Southern印記雜交中顯示出來，因此，PCR技術具有靈敏度高，特異性強的優(yōu)勢，隨著熱循環(huán)自動化的提高與穩(wěn)定也使得PCR技術的操作簡便易行。但是，PCR技術是在液相中進行的，在擴增前，需將細胞破壞，從中提取核酸作為模板，因此很難將PCR的結果與組織細胞的形態(tài)結構聯(lián)系起來，同時，也很難判斷含特異性靶序列的細胞類型。原位雜交技術是將分子雜交與組織化學技術結合起來，用標記的DNA或RNA為探針，在原位檢測組織細胞內(nèi)的特定DNA或RNA序列，因此，在顯示陽性雜交信號（即特定的DNA或RNA）時，不僅能判別含有靶序列的細胞類型，還能顯示組織細胞的形態(tài)結構特征與病理變化。但是，原位雜交對拷貝數(shù)較少的序列檢出有一定的困難，而單拷貝序列或低拷貝序列（10-20拷貝的RNA或單拷貝DNA），則不能被檢出，所以原位雜交的敏感性不夠。原位PCR技術成功地將PCR技術和原位雜交技術結合起來，保持了兩項技術的優(yōu)勢又彌補了各自的不足。原位PCR技術的待檢標本一般先經(jīng)化學固定，以保持組織細胞的良好形態(tài)結構。細胞膜和核膜均具有一定的通透性，當進行PCR擴增時，各種成分，如引物，DNA聚合酶，核苷酸等均可進入細胞內(nèi)或細胞核內(nèi)，以固定在細胞內(nèi)或細胞核內(nèi)的RNA或DNA為模板，于原位進行擴增。擴增的產(chǎn)物一般分子較大，或互相交織，不易穿過細胞膜或在膜內(nèi)外彌散，從而被保留在原位。這樣原有的細胞內(nèi)單拷貝或低拷貝的特定DNA或RNA序列在原位以呈指數(shù)極擴增，擴增的產(chǎn)物就很容易被原位雜交技術檢查。
2017解放軍文職公共基礎知識之科學技術的含義-解放軍文職人員招聘-軍隊文職考試-紅師教育
一、科學的含義科學是人對客觀世界的認識，是反映客觀事實和發(fā)展規(guī)律的知識，是關于自然界、社會和思維發(fā)展的知識體系?？茖W可以分為自然科學、社會科學和思維科學，以及總括和貫穿于三個領域的哲學和數(shù)學?？茖W標志著人的認識在實踐過程中從現(xiàn)象到本質(zhì)的深化，由經(jīng)驗水平到理性水平的升華。二、技術的含義技術是指人類在利用、改造和保護自然的過程中，通過創(chuàng)新所積累的經(jīng)驗、知識、技巧及共同協(xié)作組成的工具和規(guī)則體系?，F(xiàn)代技術已發(fā)展成為一個龐大復雜的系統(tǒng)，主要由三大基本技術，即物質(zhì)變化技術、能量轉(zhuǎn)換技術和信息控制技術組成?，F(xiàn)代技術對社會發(fā)展、經(jīng)濟發(fā)展等起著重大作用，其中典型代表的門類有：信息技術、生物工程技術、環(huán)保技術、空間技術、航空技術、能源技術等。
